在微生物學(xué)中,通過(guò)比對(duì)溶液濁度,麥?zhǔn)媳葷峁艹S脕?lái)校對(duì)細(xì)菌懸浮液至某個(gè)特定濃度。例如在醫(yī)藥學(xué)領(lǐng)域常見(jiàn)的微生物抗藥物敏感性試驗(yàn)中,用來(lái)測(cè)量較小抑菌濃度。
麥?zhǔn)媳葷峁苁峭ㄟ^(guò)混合特定濃度的氯化鋇和硫酸,從而形成硫酸鋇懸浮液。例如0.5號(hào)麥?zhǔn)媳葷峁苁怯?.05毫升1%氯化鋇溶液加9.95毫升1 %硫酸制成?,F(xiàn)在也有由乳膠粒子懸浮液制成的麥?zhǔn)媳葷峁?,與傳統(tǒng)的麥?zhǔn)媳葷峁芟啾?,保存時(shí)間更長(zhǎng)也更穩(wěn)定。
管號(hào)(McFarland) |
0.5 |
1 |
2 |
3 |
4 |
5 |
0.25%Bacl2(mL) |
0.1 |
0.2 |
0.4 |
0.6 |
0.8 |
1.0 |
1%H2SO4(mL) |
4.9 |
4.8 |
4.6 |
4.4 |
4.2 |
4.0 |
細(xì)菌的近似濃度(×10^8/mL) |
1.5 |
3 |
6 |
9 |
12 |
15 |
細(xì)菌的近似濃度(百萬(wàn)/ mL) |
150 |
300 |
600 |
900 |
1200 |
1500 |
【使用方法】
1、 輕搖標(biāo)準(zhǔn)試管。
2、 無(wú)菌操作將被測(cè)定的肉湯培養(yǎng)物加到與標(biāo)準(zhǔn)管相同直徑(大小)的無(wú)菌試管中。
3、 以無(wú)菌操作向被測(cè)定試管加入無(wú)菌蒸餾水,直到濃度與所要求的標(biāo)準(zhǔn)管的濃度相同。
【計(jì)算被測(cè)培養(yǎng)物試管的濃度】:
1、0.5號(hào)麥?zhǔn)蠞岫葮?biāo)準(zhǔn)管約相當(dāng)于1.5×10^8個(gè)細(xì)菌/ml。
2、1.0號(hào)麥?zhǔn)蠞岫葮?biāo)準(zhǔn)管約相當(dāng)于3×10^8個(gè)細(xì)菌/ml。
3、細(xì)菌濃度標(biāo)準(zhǔn)管號(hào)×3×10^8=該管號(hào)的細(xì)菌數(shù)/ml。
3、如果是酵母。相應(yīng)的數(shù)值要除以30。
【制備所要求的濃度,如需要10^5細(xì)菌的濃度】:
1、相當(dāng)1.0號(hào)麥?zhǔn)蠞岫葮?biāo)準(zhǔn)管(3×10^8)的細(xì)菌作1:3稀釋到10^8。
2、再作1:1000稀釋。為1×10^5個(gè)細(xì)菌/ml。
3、10^8÷10^5=10^3
【注意事項(xiàng)】:
A
1、若有大顆粒出現(xiàn),此標(biāo)準(zhǔn)管應(yīng)更換。
2、該比濁管僅用于微生物檢驗(yàn)中,生化試驗(yàn)的細(xì)菌數(shù)量估算,不可用于精密定量。
3、該玻璃管和蓋子可以高壓滅菌、可以重復(fù)使用。
4、標(biāo)準(zhǔn)無(wú)菌生理鹽水管僅用于空白對(duì)照,請(qǐng)勿用于配制樣品管。
B
1、如果測(cè)定的肉湯培養(yǎng)物不澄清,則由培養(yǎng)物的值減去未接種培養(yǎng)基的值來(lái)校正細(xì)菌濃度。
例: 4號(hào)管(肉湯培養(yǎng)物)-1號(hào)管(孵育過(guò)的未接種的肉湯管)=3號(hào)管(校正讀數(shù))
2、如果肉湯顏色很深,把未接種試管放在標(biāo)準(zhǔn)管的后面讀數(shù)即可。